类胡萝卜素( carotenoids)是一类重要的天然色素的总称, 普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。它是含40个碳的类异戊烯聚合物, 即四萜化合物。典型的类胡萝卜素是由8个异戊二烯单位首尾相连形成。类胡萝卜素的颜色因共轭双键的数目不同而变化。共轭双键的数目越多, 颜色越移向红色。迄今, 被发现的天然类胡萝卜素已达700多种, 根据化学结构的不同可以将其分为两类, 一类是胡萝卜素(只含碳氢两种元素, 不含氧元素,如B2胡萝卜素和番茄红素), 另一类是叶黄素(有羟基、酮基、羧基、甲氧基等含氧官能团, 如叶黄素和虾青素) 。

ɑ和ß胡萝卜素因其结构性质相似，分离是液相检测的一个难点。常规键合相如C18很难将这两种异构体实现基线分离。

本文采用赛默飞Acclaim C30色谱柱按照GB5009.83-2016方法对ɑ和ß胡萝卜素进行分离，分离度可达到2.4.

样品前处理

α-胡萝卜素：25ug/ml，甲醇-甲基叔丁基醚溶解，再用初始流动相1:1稀释；β-胡萝卜素：80ug/ml，正己烷溶解，再用初始流动相1:1稀释；

色谱条件：

色谱柱（货号）:Acclaim C30

 4.6×150 mm,3 μm(货号：075723)

流动相：A：甲醇：乙腈：水=73.5:24.5:2

B：甲基叔丁基醚

流速：1mL/min

检测器：UV，450nm

柱温：20℃

进样量：20μL

仪器：Ultimate 3000

结论

按照国标GB5009.83-2016分析胡萝卜素异构体，可以实现α-胡萝卜素和β-胡萝卜素2.39的分离度。且方法重现性良好。