生物制药行业的小伙伴们,如果您正在做蛋白电荷异构体的分析,80%-90%的人手头上都有一款ProPac WCX-10的经典色谱柱,每次拜访客户,大家都说这柱子价格贵啊!有没有妙招来延长这款柱子的寿命,降低检测成本。 我们倾听大家的心声,这里给出一些小窍门和注意事项,帮您节省时间成本和经济成本!
有图有真相,首先我们先剖析一下这跟柱子填料的结构。
经过庖丁解牛,我们知道了这根柱子的结构,那么第二步要学会看QAR( N细胞色素C>2250, 1.0
三是重点的,掏心窝的话了,仔细阅读柱子的快速操作手册。
第四步就是我们重点中的重点了,色谱柱的清洗方法。
1.对于轻度污染,使用1-2M高盐溶液在分析完成后进行清洗就可以了。
2.对于比较严重的污染,进样100-500uL或者更多进样体积的0.1-1M NaOH进行清洗。(在进行此步操作时,请在缓冲液A体系下进行,完成进样NaOH后,进样缓冲液A 500ul)
3.使用NaOH过柱子清洗。
.配置20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液(使用NaOH调节pH到6.5,,并对流动相超声脱气)。
.使用20 mmol/L NaOH为流动相,以0.5 mL/min的流速在室温下,冲洗柱子15分钟。
.使用20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液,以 1mL/min的流速平衡柱子1小时。
4.20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液高温处理。
.以0.2 mL/min或者0.5 mL/min的流速在50度下平衡柱子48小时。
.以0.5 mL/min的流速在80度下平衡柱子8小时。
5.如果有保护柱,请将保护柱和分析柱分开独立清洗。
6.如果上述清洗方法无效,且有柱压上升的现象,可以将柱子反接在系统上清洗,但是不要超过该柱子能耐受的大压力值。
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