关于色谱柱的使用与维护,确实是实验员们每天都要面对的问题,往往又容易被大家忽略。
为此,我们开了一门新课《液相色谱柱的使用与维护》,希望对童鞋们的日常工作有所帮助。
本次课程分成五个小节给大家来介绍~~
1. 色谱柱的安装和连接
2. 色谱柱的使用注意事项
3. 色谱柱的冲洗
4. 色谱柱的保存
5. 性能评价与常见问题
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色谱柱的安装和连接
您会安装色谱柱吗?
这个谁不会,往上一拧不漏液不就行了吗?
LC
色谱柱正确的安装和连接是保证实验顺利进行的第1步,因此,务必要确认色谱柱正确安装。
安装色谱柱之前
确保仪器系统正常工作,并且建议先以水-有机相体系冲洗设备,观察系统压力正常。
新色谱柱多数为纯有机相保存,如果仪器系统中有残留缓冲盐,在色谱柱安装后有导致盐析的可能,因此为避免盐析,请先使用高水相冲洗后,再置换成不含盐的流动相;
部分非C18键合相色谱柱对流动相的平衡过渡有一定要求,仪器残存流动相可能会对保留时间出现影响,因此同样需要确保仪器中无缓冲盐或特殊溶剂残留。
色谱柱安装时
请按照色谱柱标签上的箭头方向来安装色谱柱,确保配管接头连接正确,并且锥箍的顶端已插入接头内侧(下图)。
安装
在使用peek接头时,由于螺丝在管线上是可移动的,因此要保证管线*插入色谱柱入口端,即图示V=L,如果管线未能*插入,会造成色谱柱入口端死体积出现,分析时峰型易产生拖尾。
在使用金属接头时,螺丝在管线上不可移动,因此要确保管线和色谱柱匹配性,并用扳手拧紧(需要注意力度,拧得过紧会导致螺丝损坏并漏液)。
目前市场上多数厂家色谱柱规格相同,可直接替换使用,如有疑问可咨询应用工程师。
色谱柱安装后
使用不含盐的流动相置换色谱柱保存液后,再用流动相平衡系统和色谱柱。
如果担心色谱柱保存液含有盐,请先使用高水相冲洗(多数色谱柱均不耐纯水,因此避免使用纯水冲洗色谱柱)。
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