色谱柱是色谱系统的“心脏”。液相色谱柱,是一种用于液体色谱分析仪器,分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是根据填料类型决定的。
正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3-10μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
在日常使用中不注意就会出现各种突发状况,比如降低柱效缩短使用寿命甚至损坏,严重时甚至影响项目的进度。因此液相色谱柱的正确使用和维护十分重要。
1、认证阅读使用说明书;
2、使用填充良好的色谱柱;
3、尽量减少压力波动,避免机械及热冲击;
4、使用保护柱及在线过滤器;
5、经常以强溶剂冲洗色谱柱;
6、充分过滤样品及流动相,尽量避免杂质微粒与强保留成分;
7、用稳定的固定相;
8、在中等PH值操作(6~8),用有机缓冲溶液;
9、色谱柱使用温度小于40℃;
10、硅胶基质的的色谱柱,应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0;
11、在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠;
12、流动相中含有缓冲溶液,应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡,有机溶剂不能低于5%;
13、过夜或贮存时,冲洗掉盐和缓冲液,用纯有机溶剂流动相保存。