赛默飞经典型HPLC分析柱管内填有颗粒大小均匀的固定相,一般商品化离子色谱分析柱填料主要用5~15μm颗粒的高分子聚合物小球,特定场合下也采用无机氧化物(如硅胶)颗粒,目前所用填料的颗粒主要为球形,而针对填料表面结构性质(孔隙的大小),填料可以分离微孔型、大孔型和超孔型,随着离子色谱应用于复杂样品越来越多,对交换容量要求也越来越高,超孔型填料也是离子色谱的一个发展趋势。
赛默飞经典型HPLC分析柱工作流程:高压输液泵将流动相以稳定的流速(或压力)输送至分析体系,在色谱柱之前通过进样器将样品导入,流动相将样品带入色谱柱,在色谱柱中各组分被分离,并依次随流动相流至检测器。抑制型离子色谱则在电导检测器之前增加一个抑制系统,即用另一个高压输液泵将再生液输送到抑制器。在抑制器中,流动相背景电导被降低,然后将流动出物导入电导池,检测到的信号送至数据处理系统记录、处理或保存。非抑制型离子色谱仪不用抑制器和输送再生液的高压泵,因此结构相对比较简单,价格也相对比较便宜。
赛默飞经典型HPLC分析柱操作过程中需要注意事项:
1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。
2、为了使色谱柱与仪器系统达醉佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK材料的通用接头,只需用手拧紧不需要特定扳手,使用压力为5000psi;使用温度不得超过100℃。