Agilent液相色谱柱以乙烯醇共聚物为基质的色谱柱,即使其载炭量很高也能保持表面的湿润。多孔结构具有足够大的平均孔径,对小分子化合物、多肽和小分子蛋白能够产生理想的分离效果。
在有机溶剂比例较高的流动相中,该柱具有与硅胶基质色谱柱相同的柱效,但在碱性缓冲溶液为流动相条件下,其分离效率则超过硅胶色谱柱。显著的特点之一是基质被烷基化的填料的洗脱顺序,其保留能力与碳链长度成正比。
在选择Agilent液相色谱柱之前,先多了解自己的样品和杂质,他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。
1.样品是极性的且弱酸性的;就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测,即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。
2.如果样品极性太强,或酸性太强;可以选择CN,NH2,或硅胶柱,HILIC(亲水色谱),也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。
3.若样品是碱性的;可选择高纯硅胶柱(高纯硅胶缺少金属杂质,且硅胶端基封尾)或一些经过修饰的C18柱(如极性嵌入技术或碱去活技术等),他们都会减少碱性化合物的拖尾,一般会选择中性或偏碱的条件下做,因为这样可增加碱性样品的保留。
4.如果碱性化合物的极性太强,或碱性太强;可以选择宽pH的Agilent液相色谱柱在高pH值检测(优点是方法开发简单,缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少,价格也高)或者选用也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。