使用过液相的小伙伴应该都问过这样的问题吧:不同的实验应该选择什么规格的色谱柱?如何提高
ac米兰体育官网 的分离?等等,今天就和小编一起看看下面这些问题你都遇到过几个?
ac米兰体育官网 规格对分析结果会产生何种影响?
色谱柱内径决定载样量,载样量与内径的平方成正比;色谱柱长度与塔板数成正比,与柱压成正比;粒径影响涡流扩散相,粒径越小涡流扩散相越小,柱效越高,粒径与柱效近似成反比;粒径越小,压力也越大,压力与粒径的平方成反比。
填料孔径对分析对象的分子量有限制,当孔径为分析物尺寸的5倍以上时,分析物才能顺利通过孔隙,孔径处于60~120Å的色谱柱适用于相对分子量小于10000的分析物,孔径为300Å的ac米兰体育官网 可以满足分子量处于10000以上的大分子化合物分析。
何谓封端?封端的意义是什么?
硅胶表面的硅羟基(Si-OH)密度为8μmol/m2,由于空间位阻的存在,硅烷化键合反应只能覆盖50%的硅羟基,超过一半的硅羟基是活性硅羟基。
这些硅羟基与化合物的极性基团存在极性相互作用和离子交换作用,为化合物的保留增加了不被期望的作用力,往往会影响峰形。用短链氯硅烷键合活性的硅羟基,可以减小甚至消除这种影响,这种操作被称为封端(Endcap)。
封端处理的意义:
1、抑制了特异性吸附,提高了色谱峰的对称性,并改善了分离效果;
2、在一定程度上掩蔽了硅胶表面,使其对碱性环境的耐受性增强;
3、通过空间位阻掩盖了键合反应形成的Si-O-Si键,使其对酸性环境的耐受性增强;可能会影响对极性样品的选择性。