Waters液相色谱柱在使用前,先进行柱的性能测试,并将结果保存起来,作为今后评价柱性能变化的参考。在做柱性能测试时要按照色谱柱出厂报告中的条件进行,只有这样,测得的结果才有可比性。
本产品可适用范围广,从极性化合物到非极性化合物都可获得良好的分离,在碳水化合物如低聚糖、苷类糖化学,生药学和天然产物化学,生物物质如多肽、蛋白、核酸等多个领域发挥重要作用。
Waters液相色谱柱选择的条件是什么?可以从下面这些方面考虑。
1、填料基质
1)硅胶基质:纯度高本钱低,强度大,化学修饰轻易,但pH值范围有限。大多硅胶基质填料在pH2-8之间稳定,但经过特殊修饰的硅胶键合相可以稳定在pH1.5-10。
2)聚合物基质:应用pH值范围宽,温度稳定(高温可以达到80度以上),机械强度小。
2、颗粒外形
大多现代HPLC填料都是球形颗粒,但有时是不规则的颗粒。球形颗粒提供较低的柱压、较高的柱效和稳定性以及较长的柱寿命在使用高粘度的活动相时;不规则颗粒有较大比表面积和相对低廉的价格。
3、颗粒粒径
粒径越小柱效越高、分离度越高,但同时会导致较高柱压降。选择1.5-3μm的填料以解决一些复杂样品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒径的填料用作半制备或制备柱。
4、含碳量
含碳量指的是硅胶表面键合相的比例,与比表面积和键合覆盖度等有关。高含碳量进步柱容量、分辨率及分析时间,用于要求高分离度的复杂样品;低含碳量分析时间短、展现不同的选择性,用于快速分析简单样品及需要高含水活动相条件的样品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
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